Heterologe Expression der Arabidopsis SPX und PHR1 Gene in E.Coli Klonierungsmethode im genetischen Labor
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- Deutsch ausgewählt
35,90 €
inkl. gesetzl. MwSt.,
Beschreibung
Produktdetails
Einband
Taschenbuch
Erscheinungsdatum
17.11.2017
Verlag
AV AkademikerverlagSeitenzahl
56
Maße (L/B/H)
22/15/0,4 cm
Gewicht
102 g
Auflage
1. Auflage
Sprache
Deutsch
ISBN
978-620-2-20599-3
In diesem Buch wird die Klonierung und Überexpression der Phopsphatregulierenden Gene (SPX) in E.coli Bakterien beschrieben. Phosphate werden vor allem für Plasmalemma, Energieübertragungen als auch die Förderung der Blüten- und Fruchtbildung und vor allem für DNA und Proteine benötigt. In dieser Arbeit wird untersucht, ob es möglich ist, die SPX-Proteine in E.coli zu exprimieren, zu isolieren und zu testen, ob diese einzeln oder zusammen mit dem Transkriptionsfaktor PHR1 (Phosphat Starvation Response 1) P, bzw P Metabolismus relevante Moleküle binden. Hierfür wurden unterschiedliche Methoden angewandt. Die SPX-Proteine, sprich die Inserts wurden vom pJET-Vektor entnommen und ins pET-22b-Vektor ligiert. Anschließend wurden diese klonierten Plasmide in kompetente E.coli BL21 Zellen transformiert und angereichert. Die Zellen wurden durch die Zentrifuge aufgeschlossen, des weiteren wurden die SPX-Proteine durch die Nickel-Affinitätschromatographie aufgereinigt. Schließlich wurde über MALDI-TOF Massenspektrometrie Proteinsequenzüberseinstimmung ermittelt.
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